Mikoto Uchiha era a mãe de Sasuke e Itachi, além de esposa de Fugaku. Enquanto estava viva, ela parecia demonstrar mais afeto por Sasuke, enquanto seu marido mostrava preferência por Itachi. Era uma mãe atenciosa; Sasuke conseguia conversar com ela melhor do que com o pai. Em um momento em que queria animar o filho, ela dizia que, quando Fugaku e ela estavam sozinhos, tudo que ele falava era sobre Sasuke. Apesar de ser a mãe de Itachi, Mikoto tinha suspeitas quanto ao filho e sabia que algo estava acontecendo. Ela foi encontrada morta junto com o marido durante o massacre do clã Uchiha, assassinada por Itachi.