Chiyo é a avó de Sasori e irmã de Ebizo, uma shinobi da Vila Oculta da Areia que já não mais atua como tal. Ela foi fundadora da divisão de marionetes da Vila da Areia, onde treinou muitos discípulos e desenvolveu novas técnicas para criar fantoches. Além disso, Chiyo também era habilidosa na fabricação de venenos, mas sua carreira foi prejudicada quando Tsunade descobriu antídotos para todos os seus venenos durante a Grande Guerra Ninja. Isso gerou um rancor em Chiyo contra Tsunade, que ela chama de "aquela mulher lesma", graças à habilidade da outra shinobi em invocar lesmas gigantes.

O filho de Chiyo e sua esposa foram mortos pelo White Fang da Vila da Folha durante a Grande Guerra Ninja. Com isso, seu único filho Sasori ficou órfão e Chiyo se tornou responsável por criar o menino. Ao ver a tristeza do neto pela perda dos pais, ela decidiu ensinar-lhe o jutsu de fantoche para distraí-lo com um novo interesse. Sasori provou ser um gênio em jutsu de marionetes e até tinha a habilidade de criar marionetes a partir de corpos humanos. Suas primeiras criações foram as versões marionetes de seus próprios pais, mas sem que Chiyo soubesse, um ódio sombrio habitava o coração do neto.

Vinte anos antes dos eventos de Naruto parte II, Sasori fugiu da Vila da Areia e se juntou à Akatsuki. Chiyo enfrentou seu neto no arco "Resgate de Gaara" e o derrotou com a ajuda de Sakura. No fim, ela sacrificou sua vida para reviver Gaara usando uma técnica originalmente destinada a dar vida aos fantoches ao custo da própria vida. Chiyo possui habilidades como jutsu de reencarnação, que permite trazer os mortos de volta à vida ou até dar vida a um fantoche. Ela é a única capaz de realizar o jutsu, mas o preço é sua própria vida.