Osu! Karatê acontece na quinta escola técnica Kansai, conhecida pelos delinquentes, inclusive em Osaka. O clube de karatê da escola é considerado o mais durão de todos. Matsushita Tadashi, estudante do primeiro ano, entra no clube para evitar que as pessoas se mexam com ele, mas acaba enfrentando muito mais do que esperava. Em seguida, a série foca no capitão Takagi Yoshiyuki, o gangster mais temido de Osaka, e sua batalha para proteger o clube de karatê e a própria cidade.
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