Um ano depois dos acontecimentos de My‑Otome, My‑Otome Zwei tem início. Arika já é uma Otome plena, mas ainda permanece sob a tutela da Srta. Maria, pois não acumulou créditos suficientes para se formar. Nagi está presa em algum local de Áries. As nações mantêm a paz entre si e planejam preservar o S.O.L.T., discutindo a limitação do número de Otomes. Uma missão para destruir um meteoro que ameaça colidir com Earl desencadeia uma série de eventos, culminando na aparição de uma figura sombria que ataca Garderobe e várias Otomes, além da surgida de uma versão mais poderosa do escravo em todo o planeta. Para piorar a situação, a Rainha Mashiro desaparece após um debate com Arika. A trama acompanha a busca de Arika por Mashiro e os esforços de Garderobe para desvendar a verdade por trás da figura sombria.
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